Noções básicas de microscopia: Refração, índice de refração e desempenho da lente
Refração, Índice de Refração
A luz viaja em linha reta entre dois pontos em um meio isotrópico homogêneo. Ao passar por um objeto transparente de um meio de densidade diferente, ocorre a refração, que é causada pelas diferentes velocidades de propagação da luz em diferentes meios.
Quando a luz que não é perpendicular a uma superfície transparente entra em um objeto transparente (por exemplo, vidro) vinda do ar, a luz muda de direção na interface e forma um ângulo de refração com a normal.
Desempenho da lenteØ As lentes são os elementos ópticos fundamentais que compõem o sistema óptico de um microscópio. Componentes como oculares, objetivas e condensadores são todos compostos de lentes únicas ou múltiplas. Com base no seu formato, podem ser divididas em duas categorias principais: lentes convexas (lentes positivas) e lentes côncavas (lentes negativas). Ø Quando um feixe de luz paralelo ao eixo óptico passa por uma lente convexa e converge em um ponto, esse ponto é chamado de “ponto focal”. O plano que passa por este ponto e é perpendicular ao eixo óptico é denominado "plano focal". Existem dois pontos focais: o ponto focal do espaço-do objeto e o ponto focal do espaço-da imagem.
Noções básicas de microscopia - Ampliação total
Ampliação total
Ø Através da ocular
Ampliação total=Ampliação objetiva × Ampliação da ocular (se a ampliação intermediária estiver presente, multiplique também pela ampliação intermediária)
Ø Quando conectado ao vídeo
Ampliação total=Ampliação objetiva × Ampliação do adaptador × Fator de ampliação de vídeo
Ø Fator de ampliação de vídeo
Tamanho diagonal da tela de exibição/tamanho do sensor CCD
Noções básicas de microscopia - Abertura numérica
Abertura Numérica
A Abertura Numérica, abreviada como NA, é um indicador crítico para avaliar o desempenho de lentes objetivas e condensadores (especialmente objetivas). NA=n × sin (o produto do índice de refração n do meio e o seno da metade do ângulo de abertura 2 ). O ângulo de abertura, também conhecido como "abertura angular", é o ângulo formado entre um ponto do objeto no eixo óptico e o diâmetro efetivo do elemento frontal da lente da objetiva. Quanto maior o ângulo de abertura, maior o fluxo de luz que entra na lente-é diretamente proporcional ao diâmetro efetivo da lente e inversamente proporcional à distância focal.
Quanto maior o índice de refração do meio, maior o valor de NA.
Quanto maior for o ângulo de abertura, maior será o valor NA.
n=índice de refração do meio entre a objetiva e a amostra
Valores máximos típicos: Objetivo seco (0,9), Objetivo de imersão em água (1,2), Objetivo de imersão em óleo (1,4), Objetivo especial (1,6)
Noções básicas de microscopia - Resolução
Resolução
A resolução, também conhecida como “poder de resolução”, é outro parâmetro técnico importante para medir o desempenho do microscópio.
Resolução=0.61 λ / NA (onde λ é o comprimento de onda da fonte de luz e NA é a abertura numérica da lente objetiva)
A resolução de uma objetiva de luz visível é determinada por dois fatores: o valor NA da lente objetiva e o comprimento de onda da fonte de luz de iluminação. Quanto maior o valor NA e menor o comprimento de onda da luz de iluminação, maior será a resolução.
Noções básicas de microscopia-(taxa de profundidade de campo)
Ao usar um microscópio, focar um objeto permite a visualização clara não apenas de pontos naquele plano focal, mas também dentro de uma certa espessura acima e abaixo dele. Esta espessura da parte transparente é a profundidade de campo. Uma profundidade de campo maior revela toda a espessura da amostra, enquanto uma profundidade de campo menor mostra apenas uma camada fina.
Objetivo 
Todo o sistema óptico: 
